【摘 要】
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目的为了达到更好的透射电镜观察效果,总结出一种适用于外泌体等超微结构样品的制备方法。方法以巨噬细胞外泌体为例,培养巨噬细胞RAW264.7并提取上清液,超速离心纯化外泌体
【机 构】
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郑州大学基础医学院形态学实验中心微生物与免疫实验室,郑州大学基础医学院免疫学教研室
【基金项目】
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河南省重点研发与推广专项(科技攻关)项目(182102310115);河南省高等学校重点科研项目(18A310008)
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目的为了达到更好的透射电镜观察效果,总结出一种适用于外泌体等超微结构样品的制备方法。方法以巨噬细胞外泌体为例,培养巨噬细胞RAW264.7并提取上清液,超速离心纯化外泌体。磷酸缓冲液重悬后稀释5倍、10倍、20倍3个浓度梯度,在碳覆膜铜网上分别滴加样品,吸附90 s,醋酸铀染液负染30 s,透射电镜下观察并总结外泌体样品制备方法。结果透射电镜下可以看到,300目铜网上的外泌体浓度在1.0×10 11/ml左右时,外泌体数量适中,直径在100 nm左右,能明显看到圆盘状,膜结构完整,轮廓清晰。结论
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