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应用南极假丝酵母脂肪酶B（Novozym 435）在非水相体系（叔丁醇）催化乳酸和乙醇合成乳酸乙酯，通过单因素实验考察了温度、摇床转速、酶添加量、乳酸浓度、酸醇摩尔比（乳酸：乙醇）等条件对乳酸乙酯产率的影响，进一步应用响应曲面法优化了乳酸浓度、酸醇摩尔比、酶浓度等因素，获得乳酸乙酯合成的最佳条件：乳酸含量0．42mol/L、酸醇摩尔比1：6、酶浓度42g/mol、温度为50℃、摇床转速为200r／min，在此条件下乳酸乙酯的实际产率为70．21％±0．2％。