茵栀黄口服液治疗非酒精性脂肪性肝炎大鼠的机制研究

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目的探讨茵栀黄口服液治疗非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)的作用通路及分子机制。方法将30只SD大鼠随机均分为3组:对照组给予普通饮食;模型组给予高脂饮食和生理盐水灌胃;治疗组给予高脂饮食和茵栀黄口服液灌胃,持续16周。肝脏切片进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin)、油红O和Masson染色进行病理学评估,血清测定转氨酶和血脂血糖,肝脏匀浆后测定肝内甘油三酯水平。每组随机选4只大鼠,提取肝脏RNA进行RNA和小RNA测序,提取蛋白进行蛋白质谱检测,差异基因和蛋白进行KEGG通路富集分析。结果模型组大鼠造模成功,均发展为NASH,与模型组比较,治疗组大鼠体重、肝指数和脂肪指数显著降低,血清谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase, AST)、总胆红素(total bilirubin, TBIL)、总胆固醇(totalcholesterol, TC)、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)和肝脏甘油三酯(triglyceride, TG)水平显著下降且肝脏脂肪变、气球样变和小叶炎症水平出现缓解。模型组比对照组显著升高且治疗组比模型组显著下降的交集基因有56个、miRNA有51个、蛋白35个,KEGG通路分析发现富集于Toll样受体、过氧化物酶体增殖物活化受体(peroxisome proliferator-activated receptor, PPAR)、核转录因子(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells, NF-κB)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factors, TNF)、脂肪酸代谢和胰岛素抵抗信号通路等;模型组比对照组显著降低且治疗组比模型组显著升高的交集基因有7个、miRNA有36个、蛋白35个,它们主要富集于氧化磷酸化、PPAR、丙酮酸代谢、非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)等相关通路。结论茵栀黄口服液可以通过抑制脂质合成与促进脂质氧化代谢、抑制氧自由基的产生以及抑制炎症相关蛋白和多种趋化因子来缓解NASH。
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