【摘 要】
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目的:通过构建绿色荧光蛋白p21-EGFP融合基因表达载体,观察其在小鼠卵母细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对小鼠卵母细胞细胞周期的影响提供实验基础。方
【机 构】
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中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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973规划项目(G1999055900-2);国家自然科学基金重点资助项目(39730460)
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目的:通过构建绿色荧光蛋白p21-EGFP融合基因表达载体,观察其在小鼠卵母细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对小鼠卵母细胞细胞周期的影响提供实验基础。方法:以含有p21的全长序列的质粒为模板PCR扩增p21cDNA,应用基因重组技术与EGFP基因融合,构建以绿色荧光蛋白EGFP为报告基因的重组表达质粒pEGFP-p21。利用显微注射方法注射到小鼠卵母细胞中进行表达,用荧光显微镜直接观察pEGFP-p21融合蛋白在细胞中的分布和定位,Western Blot方法检测其蛋白的表达。经酶
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