【摘 要】
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在Pima 90幼苗接种黄萎病病原菌后2、4、8、12、24、48、72和96 h分批取幼根以抽提棉花总RNA.以未接种病原的棉花cDNA为驱动方,利用SSH法对接种病原后的棉花cDNA进行差减杂交
【机 构】
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华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室
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在Pima 90幼苗接种黄萎病病原菌后2、4、8、12、24、48、72和96 h分批取幼根以抽提棉花总RNA.以未接种病原的棉花cDNA为驱动方,利用SSH法对接种病原后的棉花cDNA进行差减杂交.对杂交后的cDNA进行T/A克隆并转化到大肠杆菌中完成文库构建,共获得了534个克隆.以M13引物对扩增插入片段进行PCR扩增,电泳结果显示插入片段大小从0.2～1.2 kb不等,平均大小为0.5 kb.将克隆中的插入片段点种于尼龙膜上,分别以病原诱导前后的总cDNA为探针进行反向Northern杂交.对78
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