论文部分内容阅读
目的
探讨RNA干扰细胞外基质金属蛋白酶诱导分子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)的表达对胰腺星状细胞(pancreatic stellate cell,PSC)增殖、侵袭及转移能力的影响。
方法应用QRT-PCR法及细胞免疫组化法检测EMMPRIN在PSC中mRNA含量及蛋白的表达;PSC经RNA干扰后,Western blot法检测EMMPRIN在PSC中封闭效果,MTT、软琼脂法检测细胞增殖能力,Transwell法检测EMMPRIN封闭前后PSC(PSC-NC, PSC-EMMPRINi)细胞侵袭能力,ELISA法检测MMPRIN封闭前后PSC(PSC-NC, PSC-EMMPRINi)及与ASPC细胞联合培养后(ASPC-NC/PSC-NC,ASPC-EMMPRINi/PSC-EMMPRINi)培养基中MMP2、VEGF的分泌量。
结果PSC中EMMPRIN mRNA呈高表达(1 848.67±281.01)copies/μl, EMMPRIN蛋白主要定位于PSC的细胞膜及细胞质中,PSC经RNA干扰后,EMMPRIN蛋白在PSC中下调70%~90%,EMMPRIN封闭前后PSC增殖能力差异无统计学意义(P=0.199), EMMPRIN封闭后PSC-EMMPRINi及联合培养ASPC-EMMPRINi/PSC-EMMPRINi的培养基中MMP2分泌量较封闭前PSC-NC及ASPC-NC/PSC-NC稍减少(P=0.16),PSC-EMMPRINi较PSC-NC侵袭能力显著降低(P=0.046)。
结论干扰EMMPRIN在PSC中的表达可抑制其侵袭浸润能力。