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根据GenBank中猪伪狂犬病病毒（PRV）gE基因的序列（EF552427），利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针，从猪伪狂犬病病毒（PRV）感染的细胞中提取DNA，进行PCR扩增。将鉴定正确的gE基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中，转化大肠杆菌JM109，经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化，建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序。经临床应用