【摘 要】
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目的:探究紫外线抵抗相关基因(UVRAG)对金黄色葡萄球菌(SA)诱导HeLa细胞自噬及胞内菌存活的影响.方法:通过SA刺激HeLa细胞建立体外感染模型,分别用UVRAG小干扰RNA(siRNA)及pC
【机 构】
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内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特,010018;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆,163319
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目的:探究紫外线抵抗相关基因(UVRAG)对金黄色葡萄球菌(SA)诱导HeLa细胞自噬及胞内菌存活的影响.方法:通过SA刺激HeLa细胞建立体外感染模型,分别用UVRAG小干扰RNA(siRNA)及pCI-neo-HA-hUVRAG质粒转染HeLa细胞.Western blot法检测自噬相关蛋白LC3B、p62及UVRAG的表达水平.用EGFP-LC3质粒及pCI-neo-HA-hUVRAG质粒共转染HeLa细胞后SA感染细胞,激光共聚焦显微镜观察EGFP-LC3的点状聚集.分别用UVRAG siRNA及pCI-neo-HA-hUVRAG质粒转染HeLa细胞后SA感染细胞,平板计数法计算胞内SA数量.结果:SA感染HeLa细胞能够引起自噬水平升高以及UVRAG的表达升高,UVRAG siRNA能够抑制LC3Ⅱ的表达,促进p62的表达.过表达UVRAG能够促进LC3Ⅱ的表达,抑制p62的表达.过表达UVRAG使EGFP-LC3的点状聚集增多,并且抑制胞内菌的存活,UVRAG siRNA促进胞内菌的复制.结论:SA感染宿主细胞诱导UVRAG表达的增加可以增强自噬水平并且抑制胞内菌的存活.
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