二磷酸腺苷琼脂糖亲和层析法纯化HSP70多肽复合物

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:GGGFFFAA1
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采用二磷酸腺苷(ADP)琼脂糖亲和层析的方法,从小鼠肝脏或肿瘤组织中纯化热休克蛋白(HSP)70多肽复合物.用Western blot和硝酸银染色对所纯化的蛋白质进行鉴定,表明纯化的蛋白质为均一的HSP70.为了证实纯化的HSP70是否为HSP70多肽复合物,将此纯化物与10 mmol/L ATP,3 mmol/L MgCl2,0.5 mmol/L CaCl2孵育后,用centricon 10滤过并收集小分子片段,经反向高压液相色谱分析,发现在215nm和220 nm有很多吸收峰,证明此HSP70为HSP
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