【摘 要】
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目的探讨野生型p16基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts, KFb)生长增殖及DNA合成代谢的影响. 方法构建含p16cDNA片段的真核表达载体pcDNA3-p16,采用脂质体介导的
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目的探讨野生型p16基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts, KFb)生长增殖及DNA合成代谢的影响. 方法构建含p16cDNA片段的真核表达载体pcDNA3-p16,采用脂质体介导的基因转染法,将其导入体外培养的KFb中,并用G418筛选阳性克隆.随后对已转染及未转染的KFb进行免疫细胞化学染色,观察p16蛋白的表达,并通过绘制细胞生长曲线及采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法,比较转染前后细胞在生长增殖及DNA合成代谢方面的变化.结果经酶切鉴定证实,pcDNA3-p16构建成功.已转染的KFb经G418筛选,出现阳性克隆,并有p16蛋白表达;与正常KFb比较,其生长增殖速度明显减缓,DNA合成代谢能力明显减弱(P
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