【摘 要】
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目的制备抗弓形虫SAG1单克隆抗体(McAb). 方法将pET32(a)-trSAG1重组质粒转化Escherichia coli BL21(DE3),用0.1 mmol/L IPTG诱导表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过Ni-
【机 构】
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南方医科大学中医药学院检验教研室,南方医科大学寄生虫学教研室
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目的制备抗弓形虫SAG1单克隆抗体(McAb). 方法将pET32(a)-trSAG1重组质粒转化Escherichia coli BL21(DE3),用0.1 mmol/L IPTG诱导表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过Ni-NTA一步法纯化,以纯化的rSAG1为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出分泌高滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,Western blot分析其特异性. 结果筛选出能稳定分泌抗rSAG1单克隆抗体的5株杂
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