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目的
探讨低氧对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelia cell，HUVEC)增殖的影响及调控机制。
方法HUVEC在不同氧浓度(1%、5%、21%O2)，37 ℃ 5%CO2培养24 h，WST-1法检测增殖。生物信息学预测miR-99a靶基因并利用双荧光素酶报告基因检测方法验证。Lipofectamine 2000将miR-99a mimics、miR-99a siRNA、哺乳类动物雷帕霉素受体(mammalian target of rapamycin, mTOR) siRNA、mTOR cDNA转染HUVEC，低氧下继续培养。qRT-PCR检测miR-99a表达，RT-PCR及Western blot检测mTOR表达。
结果与常氧(21% O2)相比，低氧(1% O2)显著抑制HUVEC增殖(33.3%±6.5%，P＝0.004)。低氧上调miR-99a表达[(1.94±0.24)倍，P＝0.001]，进而抑制HUVEC增殖。生物信息学及荧光素酶报告基因系统检测显示mTOR为miR-99a靶基因，低氧时miTR-99a抑制mTOR基因及蛋白水平表达。进一步研究显示低氧通过miR-99a-mTOR途径抑制内皮细胞增殖。
结论低氧处理明显抑制HUVEC增殖，其机制可能与miR-99a-mTOR途径有关。