pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒的构建及在MCF-7乳腺癌细胞中的转染

来源 :实用肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：macg27

【摘要】

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目的构建pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒，并进行鉴定。为进一步研究Smad3在抑制乳腺癌生长机制中起到的作用提供实验基础。方法利用RT—PCR方法从MCF-7乳腺癌细胞中获得cDNA，应用P

【作者】

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白明瀚陈洪生刘明

【机构】

：

哈尔滨医科大学附属第四医院肿瘤外科

【出处】

：

实用肿瘤学杂志

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

：

EGFP SMAD3 真核表达载体 MCF-7乳腺癌细胞 EGFP Smad3 Eukaryotic expression vector MCF -

【基金项目】

：

黑龙江省留学归国科学基金项目（LC201009）,黑龙江省杰出青年科学基金（JC201203）

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目的构建pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒，并进行鉴定。为进一步研究Smad3在抑制乳腺癌生长机制中起到的作用提供实验基础。方法利用RT—PCR方法从MCF-7乳腺癌细胞中获得cDNA，应用PCR方法扩增、提取Smad3的基因片段，酶切后与pEGFP—C3真核表达载体连接，构建pEG—FP—C3／Smad3真核表达质粒，进行测序、酶切鉴定，表明质粒构建成功。将构建的质粒瞬时转染至MCF-7乳腺癌细胞中，通过荧光倒置显微镜观察、RT—PCR技术及Westenblot技术鉴定转染是否成功。结果本实验成功

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