【摘 要】
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目的 研究单极纺锤体蛋白激酶1( Mps1)与蛋白酶体α7亚基( PSMA7)是否存在蛋白间相互作用. 方法 以真核表达质粒pCMV-C-Myc-PSMA7为模板,pGEX-4T-1为载体,构建原核表达载体pG
【机 构】
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辽宁医学院,辽宁锦州 121000;济南军区总医院实验诊断科,济南 250031;军事医学科学院生物工程研究所,北京 100850;军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850;济南军区总医院实验
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目的 研究单极纺锤体蛋白激酶1( Mps1)与蛋白酶体α7亚基( PSMA7)是否存在蛋白间相互作用. 方法 以真核表达质粒pCMV-C-Myc-PSMA7为模板,pGEX-4T-1为载体,构建原核表达载体pGEX-4T-1-PSMA7( GST-PSMA7);并通过GST pull-down及免疫共沉淀实验检测Mps1与PSMA7之间是否存在相互作用. 结果 免疫印迹实验结果证实,构建的原核表达载体pGEX-4T-1-PSMA7(GST-PSMA7)能正确表达;GST pull-down及免疫共沉淀实验表明,Mps1与PSMA7之间存在蛋白质间相互作用. 结论 成功构建了原核表达载体pGEX-4T-1-PSMA7(GST-PSMA7),并在大肠杆菌中得到了表达;Mps1与PSMA7之间存在相互作用,为进一步研究两者之间的关系及Mps1功能的影响打下基础.“,”Objective To study the interaction between the monopolar spindle 1(Mps1)and proteasome subunit alpha type-7( PSMA7).Methods Prokaryotic expression plasmid pGEX-4T-1-PSMA7 (GST-PSMA7) was constructed by subcloning from eukaryotic expression plasmid pCMV-C-Myc-PSMA7.GST pull-down and co-immunoprecipitation( co-IP) were used to test the interaction between the Mps1 and PSMA7.Results The plasmid pGEX-4T-1-PSMA7(GST-PSMA7) expressed GST tagged PSMA7 protein in E.coli.GST pull-down and co-IP showed that Mps1 associated with PSMA7. Conclusion GST-PSMA7 plasmid is constructed.The results of interactions between Mps1 and PSMA7 will contribute to a further study of the function of Mps1.
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