小干扰RNA介导丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮细胞的影响

来源 :中华眼底病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:legna1212
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 观察丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响.方法 体外培养人RPE细胞,取第8~12代生长良好的传代细胞用于实验.将细胞分为正常对照组、光损伤模型组.采用波长400 nm的蓝色节能灯以(2000±500) Lux持续光照RPE细胞6h建立光损伤模型.建模后光损伤模型组再分为针对HtrA1的小干扰RNA(HtrA1 siRNA)组、阴性对照组、空白对照组.应用脂质体RNAimax将HtrA1 siRNA转染至HtrA1 siRNA组细胞;阴性对照组细胞转染非特异的阴性siRNA;空白对照组为单纯光损伤细胞.采用细胞计数试剂盒、transwell小室法及流式细胞仪检测各组细胞增生、迁徙、凋亡以及细胞周期情况;实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测细胞中HtrA1和血管内皮生长因子A(VEGF-A) mRNA、蛋白质表达.结果 光损伤模型组细胞中HtrA1 mRNA、蛋白表达均较正常对照组细胞明显升高,差异有统计学意义(t=17.62、15.09,P<0.05).与阴性对照组、空白对照组比较,HtrA1 siRNA组细胞增生(t=6.37、4.52)、迁徙能力(t=9.56、12.13)、凋亡率(t=23.37、29.08)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞停留在G0/G1期数目增多(t=6.24、4.93),差异有统计学意义(P<0.05);HtrA1、VEGF-A mRNA(t=17.36、11.32、7.29、4.05)和蛋白(t=12.02、15.28、4.98、6.24)表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 特异性沉默HtrA1基因表达可降低蓝光对人RPE细胞增生、迁徙能力的损伤和细胞凋亡率;下调VEGF-A的表达.
其他文献
Cerium contained conversion films were deposited on LC4 aluminum alloy using square wave pulse (SWP) in a CeC13 solution with KMnO4 as the oxidant. Energy dispe
A mixed algorithm of central and upwind difference scheme for the solution of steady/unsteady incompressible Navier-Stokes equations is presented. The algorithm
@@
目的 观察探讨黄芪注射液对模拟高原缺氧环境大鼠视网膜组织的影响及其机制.方法 成年健康Sprague Dawley大鼠60只随机分为黄芪注射液干预组(干预组)和生理盐水对照组(对照组
我是神奇的画家天空是大大的画纸只要我轻轻点着烟火瞧!红红的爆竹花
从自动化技术在航空业的最初扩展时期开始,一系列的研究确认了自动化在飞行运作中的作用。发展初期的自动驾驶仪,最早是为了减轻驾驶员长途飞行的疲劳而设置的,它可代替驾驶员的
宋代有一位画家这样说过:“山欲高,尽出之则不高,烟霞锁其腰则高;水欲远,尽出之则不远,掩映断其脉则远矣。”意思就是,画山不要把山顶画出来,只要画出云雾缭绕的山腰,足可见
沪教版九年级化学上册第6页【观察与思考】实验如图1所示,笔者在操作时发现存在一些问题。
目的 观察玻璃体腔注射人脐带间充质干细胞(hUCMSC)体外诱导的神经干细胞(NSC)对糖尿病大鼠视网膜功能及结构的影响.方法 健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分为正常对照
目的 观察探讨视网膜血管管径与颈动脉狭窄患者脑梗死发生的相关性.方法 彩色多普勒血流显像检查确诊的颈动脉狭窄患者87例174只眼纳入研究.患者中,男性49例,女性38例;平均年