通过观察核转录因子κB（NF-κB）p65在大骨节病患者全血和软骨细胞（C28/I2）中的表达，分析NF-κB p65分子在软骨细胞凋亡中的作用，阐明NF-κB信号通路在大骨节病发病机制中的作用。
方法采用病例-对照研究方法，从陕西省大骨节病病区旬邑、永寿、长武、麟游、千阳、陇县选择161例大骨节病患者作为病例组，同时选取性别、年龄相匹配的312名健康人作为对照组，采集病例组和对照组人群肘静脉血，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，用于NF-κB p65蛋白测定。采用成组设计及细胞培养方法，建立人C28/I2软骨细胞氧化损伤模型，实验分为4组：对照组、叔丁基过氧化氢（tBHP）损伤组（tBHP 300.00 μmol/L）、低硒预保护组[亚硒酸钠（Na2SeO3）0.05 mg/L + tBHP 300.00 μmol/L]、中硒预保护组（Na2SeO3 0.10 mg/L + tBHP 300.00 μmol/L），Hoechst 33342染色检测各组细胞凋亡情况，二氯荧光黄法检测细胞内活性氧（ROS）含量。应用Trizol法从全血和软骨细胞中提取蛋白，采用蛋白质免疫印迹法检测全血及软骨细胞中NF-κB p65信号分子的蛋白表达。
结果病例组与对照组在年龄和性别分布上差异均无统计学意义（t= 0.336，P > 0.05；χ2= 0.407，P > 0.05）。病例组全血中NF-κB p65蛋白表达明显升高，约为对照组的1.835倍（病例组：0.167 ± 0.026，对照组：0.091 ± 0.014；t = 5.147，P < 0.01）。荧光显微镜下，tBHP损伤组细胞多呈强蓝色荧光，凋亡细胞数量多；且细胞内ROS含量（1.219 ± 0.104）高于低、中硒预保护组（0.832 ± 0.077、0.635 ± 0.070，P均< 0.05）。tBHP损伤组NF-κB p65蛋白表达（1.563 ± 0.351）明显高于对照组（0.451 ± 0.069，P < 0.05）；低、中硒预保护组NF-κB p65蛋白表达有低于tBHP损伤组的趋势。
结论大骨节病患者NF-κB信号通路表达上调，NF-κB p65信号分子在氧化损伤所致的软骨细胞凋亡中具有一定作用，提示NF-κB信号通路在大骨节病发病机制中发挥了一定的作用。