西瓜花叶病毒HC—Pro基因的克隆与原核表达

来源 :河南师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:qqqqq770627
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利用RT-PCR方法获得了西瓜花叶病毒(WMV)陕西分离物HC-Pro基因,大小为1371bp.将HC—Pro基因克隆到pMD18-T SimpleVector,测序分析发现与其它国家HC—Pro核苷酸同源性为90.7%~94.8%.将HC—Pro基因定向插入EcoRⅠ/SalⅠ切开的pET30a中,构建了原核表达载体pET30-WHC,转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导2~8h后,成功表达了分子量约为57kD的HC-Pro蛋白.通过不同时间诱导发现,加入IPTG2h后蛋白开始表达,继续诱导到8h后表达
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