【摘 要】
：
目的将聚己内酯(PCL)薄膜与1，1′-双十八烷基-3，3，3′，3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐(DiI)标记的骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养，制备细胞补片。方法取1只清洁级SD大鼠作为实验对象，通过分离培养获得大鼠BMSCs，并进行流式细胞仪鉴定表面标志物。BMSCs培养至3代后，使用DiI染料对BMSCs标记，将DiI标记的BMSCs与PCL制成的薄膜共培养，24h后在荧光显微镜下观察细胞生长情况，并固定进行电镜扫描，在培养的1、4、7、10d分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖。多组间
【机 构】
：
首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所心脏外科 100029解放军总医院第三医学中心超声科，北京 100039阳光融和医院心脏中心，潍坊 261205首都医科大学附属北京安贞医院-北京
论文部分内容阅读
目的将聚己内酯(PCL)薄膜与1，1′-双十八烷基-3，3，3′，3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐(DiI)标记的骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养，制备细胞补片。
方法取1只清洁级SD大鼠作为实验对象，通过分离培养获得大鼠BMSCs，并进行流式细胞仪鉴定表面标志物。BMSCs培养至3代后，使用DiI染料对BMSCs标记，将DiI标记的BMSCs与PCL制成的薄膜共培养，24 h后在荧光显微镜下观察细胞生长情况，并固定进行电镜扫描，在培养的1、4、7、10 d分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD分析。
结果BMSCs流式细胞术鉴定：CD90、CD44H强阳性，CD11b/c、CD45阴性。荧光显微镜下，可见DiI标记的BMSCs发红光，呈梭形或多边形。扫描电镜下，PCL薄膜与DiI标记的BMSCs共培养形成的细胞补片，其表面细胞数量多，细胞状态正常。CCK-8测定结果显示第1天吸光度(A)值为0.330±0.025；第4天A值为0.620±0.012，第7天A值为1.033±0.144，第10天A值为1.223±0.133。各时间点A值之间差异有统计学意义(F＝66.441，P
其他文献
目的探讨术前血常规联合血清肿瘤标志物在胃癌腹膜转移转移中的预判价值。方法选取2015年3月至2016年3月广东医科大学附属医院胃肠外科收治的131例胃癌患者临床资料，据病理诊断分为腹膜转移组29例，非腹膜转移组102例。分别采用直接化学发光法及自动化血液仪检测分析术前血清肿瘤标志物与中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)水平。以癌胚抗原(CEA)≥5μg/L、糖类抗原(CA)199≥35U/L、CA125≥35U/L定义为阳性，NLR大于其对应截断值定义为阳性。通过建立Logistic回归分析，绘制受试者工作
目的探讨胃癌组织中微小RNA-301(miR-301)表达水平与肿瘤细胞对奥沙利铂(L-OHP)化疗敏感性的关系。方法收集75例新鲜胃癌组织及癌旁黏膜组织，荧光实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测组织中miR-301及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、生存素(Survivin)、NFKB抑制物与Ras互作因子类似物2基因(NKIRAS2)mRNA表达；将组织制备单细胞悬液，噻唑蓝(MTT)法检测胃癌细胞对L-OHP的体外敏感性；分析miR-301与bcl-2、Survivin、NKI
目的观察低氧微环境对胃癌细胞增殖、转移功能的影响，并探讨其相关的分子学机制。方法细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、Transwell法检测SGC-7901细胞经低氧处理后的增殖、迁移及侵袭能力，应用高通量测序(IlluminaHiseq)对低氧处理后的微小RNA(miRNA，miR)差异基因进行检测；实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法、干扰低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达法验证低氧环境下HIF-1α诱导miR-210的能力；后在正常胃黏膜组织、胃癌及癌周组织中检测miR-210的表达，分析其表达
目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-520e对前列腺癌细胞多西他赛耐药性的影响及其机制。方法2019年5月至2019年12月，从福建医科大学附属第一医院泌尿外科前列腺癌手术患者癌旁组织获取原代CAFs，提取并鉴定CAFs外泌体后，将其与PC-3细胞共培养，细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测其在高浓度(30nmol/L)、低浓度(5nmol/L)多西他赛条件下细胞增殖能力，计算细胞抑制率。构建高表达及低表达miR-520e的CAFs，提取外泌体后与PC-3细胞共培养，检测其对
目的探讨13-顺式维A酸(13-cisRA)对神经母细胞瘤(NB)细胞衰老的调控作用及机制。方法NB细胞株分为空载体对照组、CCCTC结合因子(CTCF)过表达组、随机干扰组、CTCF干扰组，筛选稳定过表达、敲低CTCF的亚克隆细胞株；二甲基亚砜(DMSO)、13-cisRA分别处理空载体对照组、CTCF过表达组前后，采用实时定量PCR、Westernblot法检测瘤细胞中CTCF及靶基因的转录水平和蛋白表达变化；噻唑蓝(MTT)比色分析法检测细胞增殖活性；β-Gal原位染色法检测细胞衰老程度的改变。组间
目的探讨木犀草素对食管癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法分别用0μmol/L(对照组)、25μmol/L(低剂量木犀草素组)、50μmol/L(中剂量木犀草素组)及100μmol/L(高剂量木犀草素)浓度木犀草素处理EC9706细胞3d。分别转染anti-微小核糖核酸(miR)-NC、anti-miR-718、miR-NC及miR-718mimics至EC9706细胞，转染anti-miR-NC及anti-miR-718细胞分别标记为anti-miR-NC组及anti-miR-718组。用100μmol
目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-597靶向Rab23对肝癌细胞增殖、凋亡和周期的影响及其分子机制。方法选取南阳市中心医院2017年5月到2019年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常肝细胞LO2、肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721和Huh7中miR-597表达水平；采用慢病毒在肝癌细胞系HepG2构建对照miRNA和miR-597过表达细胞系，分别为对照组和观察组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和异体移植瘤实验分析肿瘤细胞
目的探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)死亡、增殖、分化、迁徙等生物功能的影响。方法通过RNA干扰技术降低RIPK1在BMSCs中的表达后，光镜观察细胞形态变化，Transwell细胞迁移实验检测BMSCs迁移能力变化，细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测BMSCs增殖变化，茜素红染色检测BMSCs成骨分化能力变化，油红O染色检测BMSCs成脂分化能力变化，阿新蓝染染色检测BMSCs成软骨分化能力变化，蛋白质印迹法(Westernblot)分析BMSCs分化相关标志分子
目的观察泡型肝包虫病患者肝组织中Smad2、Smad5、Smad7蛋白表达，探讨各蛋白亚型在泡型肝包虫病肝纤维化进程中的作用、表达量的变化及其关系。方法收集20例泡型肝包虫病患者术中肝组织标本，根据泡性肝包虫病患者病灶液化范围及手术切除标准，每例分为A组(距离病灶0.5cm内)、B组(距离病灶0.5~1.5cm之间)、C组(距离病灶1.5cm以外的肝组织)。对标本行苏木精-伊红(HE)及Masson染色，检测各组织纤维化，同时利用蛋白质印迹法(Westernblot)技术检测Smad2、Smad5、Sma
目的探讨芳香烃受体核转录蛋白样1(BMAL1)对肾纤维化的影响及机制。方法将HK-2细胞简单随机分组：对照组(A组)、转化生长因子-β1(TGF-β1)-5ng/ml组(B组)、TGF-β1-10ng/ml组(C组)、TGF-β1 si-BMAL1组(D组)、TGF-β1 BMAL1-OE组(E组)、TGF-β1 si-BMAL1 PD98059组(F组)，各组给予相应的干预措施，用蛋白质印迹法(Westernblot)检测BMAL1、纤维连接蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原纤维蛋白(COL-Ⅰ)