烟草NtTkr尾部T1084缺失和替换突变原核表达载体的构建及诱导表达

来源 :华北农学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：youyou061017

【摘要】

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已知烟草驱动家族新成员NtTkr尾部第3个卷曲螺旋(Coiled-coil,CC3)第1084位苏氨酸(T1084)对靶蛋白的结合至关重要,通过对NtTkr尾部的酵母双杂交筛选得到多个与Ntkr互作的候选

【作者】

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童文艳胡孟可徐林娜乔慧聪李芬

【机构】

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河南师范大学生命科学学院

【出处】

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华北农学报

【发表日期】

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2019年3期

【关键词】

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烟草 NtTkR 缺失和替换突变载体构建诱导表达

【基金项目】

：

教育部留学回国人员启动基金项目(5201049130104)

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已知烟草驱动家族新成员NtTkr尾部第3个卷曲螺旋(Coiled-coil,CC3)第1084位苏氨酸(T1084)对靶蛋白的结合至关重要,通过对NtTkr尾部的酵母双杂交筛选得到多个与Ntkr互作的候选蛋白。为确定T1084缺失(T1084d)或替换(T1084A)突变对NtTkr与这些候选蛋白体外互作的重要性,首先以pBI121-NtTkr为模板,通过重叠延伸PCR扩增得到烟草NtTkr尾部T1084d、T1084A片段并将其克隆入质粒pUC19,经蓝白斑筛选、SmaⅠ-BamHⅠ双酶切鉴定后送去测序

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