【摘 要】
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目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2（CHP2）的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室
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目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2（CHP2）的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋白1（NHE1）共转染PS120细胞;采用激光共聚焦显微镜、膜滤过法、免疫共沉淀等手段,明确CHP2结合Ca2＋的数量、部位,以及对CHP2与NHE1结合的影响;在血清饥饿条件下,观察表达EF-hand突变的CHP2（NHE1/CHP2-EF3m/4m）对细胞生存的影响。结果分别突变EF-hand结构EF
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