【摘 要】
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目的研究海蓬子皂苷甲（BA）诱导细胞自噬的作用及其机制。方法采用倒置荧光显微镜法、流式细胞仪法和Western blot法从3个不同角度检测细胞自噬;免疫印迹法检测mTOR信号通路;MTT
【机 构】
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江苏省中国科学院植物研究所江苏省植物资源研究与利用重点实验室天然产物研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No 81402829);海洋公益性行业科研专项经费资助(No 201505023);江苏省自然科学基金资助项目(No BK20131338)
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目的研究海蓬子皂苷甲（BA）诱导细胞自噬的作用及其机制。方法采用倒置荧光显微镜法、流式细胞仪法和Western blot法从3个不同角度检测细胞自噬;免疫印迹法检测mTOR信号通路;MTT法检测BA单独或联合3-MA作用后细胞的存活率。结果 BA可诱导MCF7细胞发生自噬,具有剂量依赖性。BA可抑制mTOR磷酸化激活,抑制mTOR下游p70S6K蛋白丝氨酸（Ser）、苏氨酸（Thr）的磷酸化以及4EBP1的磷酸化。且随着BA浓度升高,Akt和pERK表达降低。3-MA与10μmol·L-1BA联合用药时,细胞存活率明显低于单独使用BA处理的细胞。结论海蓬子皂苷甲通过抑制Akt和p-ERK蛋白表达,进而抑制mTOR激活,最终诱导人乳腺癌MCF7细胞发生自噬。
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