【摘 要】
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目的:通过比较知母盐制前后化学成分的含量变化,以及对2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗的影响,探讨知母盐制后降糖作用增强的炮制原理。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS）测定生知母、盐知母中7种知母皂苷及芒果苷的含量,色谱条件设定为流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～1 min,90%～80%A;1～2 min,80%～78%A;2～5.5 min,78%～70%
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81102810）； 辽宁省自然科学基金项目（2018010410-30）；
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目的:通过比较知母盐制前后化学成分的含量变化,以及对2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗的影响,探讨知母盐制后降糖作用增强的炮制原理。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS）测定生知母、盐知母中7种知母皂苷及芒果苷的含量,色谱条件设定为流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～1 min,90%～80%A;1～2 min,80%～78%A;2～5.5 min,78%～70%A;5.5～10.5 min,70%～40%A;10.5～12 min,40%～20%A;12～12.1 min,20%～90%A;12.1～13 min,90%A）,流速0.3 mL·min-1;质谱条件为电喷雾离子源（ESI）,负离子采集模式,采集范围m/z 100～1 200。建立2型糖尿病KKAy小鼠模型,将成模小鼠随机分为模型组、生知母组、盐知母组,另设C57BL/6J小鼠作为空白组,每组9只。各给药组灌胃给予相应药液（7.2 g·kg-1·d-1）,空白组、模型组给灌胃同体积生理盐水,每日1次,连续21 d。每周检测各组小鼠空腹血糖（FBG）,于最后1次给药3 h后眼球取血,利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组小鼠血清中的空腹胰岛素（FINS）,瘦素（LEP）,糖化血红蛋白（HbA1c）,糖化白蛋白（GA）和胰高血糖素样肽-1（GLP-1）水平,计算胰岛敏感指数（ISI）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;采用实时荧光定量聚合酶链反应法（Real-time PCR）检测各组小鼠肝组织和脂肪组织中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1（PGC1）mRNA的表达。结果:知母经盐制后,所测的8种化学成分含量均有升高,其中知母皂苷AⅢ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷Ⅰa和芒果苷的含量升高显著,其含量依次增加了43.78%,38.77%,25.84%,28.21%,22.51%,24.04%。生知母、盐知母均能明显降低2型糖尿病小鼠FBG,FINS,HOMA-IR,HbA1c,LEP和GA水平（P＜0.05,P＜0.01）,均能明显升高ISI和GLP-1水平（P＜0.05,P＜0.01）,均能明显上调肝组织及脂肪组织中PI3K,PGC1 mRNA的表达（P＜0.05）,且盐知母作用优于生知母。结论:生知母、盐知母对自发性2型糖尿病KKAy小鼠均有显著的降糖作用,且知母盐制后能够促进机体胰岛素分泌,增加机体对胰岛素的敏感性,使降血糖作用增强,推测知母盐制后多种知母皂苷及芒果苷含量的增加是盐知母降血糖作用增强的物质基础。
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