以cRNA为内在参照物测定人支气管肺泡洗出液细胞TNFα mRNA的含量

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xzh_endless
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本文尝试了以 cRNA 为内在参照物,以逆转录—DNA 聚合酶链反应测定人支气管肺泡洗出液细胞肿瘤坏死因子αmRNA 含量的方法。自一重组质粒(pAW 108)体外转录出互补 RNA(cRNA),此cRNA 含两段肿瘤坏死因子α特异性引物序列。将 cRNA 用分光光度计定量后取一定量和提取自人支气管肺泡洗出液细胞的 mRNA 混在一起做逆转录,得到的 cDNA 混合物经1:3稀释后以肿瘤坏死因子α特异性引物做 DNA 聚合酶链反应放大.在反应中加入一定量末端标记~(32)P 的引物.放大产物经琼脂糖凝胶电
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