巴什拜羊SPLUNC1基因的克隆与真核表达

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：anjialaogong

【摘要】

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为了克隆巴什拜羊SPLUNC1基因并表达该蛋白,本试验从巴什拜羊肺脏组织中提取总RNA,利用RTPCR方法扩增出SPLUNC1基因开放阅读框序列,将该基因片段插入到真核表达质粒pPIC9K中

【作者】

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王继雪沈文孙延鸣

【机构】

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石河子大学动物科技学院

【出处】

：

中国畜牧兽医

【发表日期】

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2018年3期

【关键词】

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巴什拜羊 SPLUNC1基因克隆真核表达 Bashibay sheep SPLUNC1 gene cloning eukaryotic expressi

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（31460686）

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为了克隆巴什拜羊SPLUNC1基因并表达该蛋白,本试验从巴什拜羊肺脏组织中提取总RNA,利用RTPCR方法扩增出SPLUNC1基因开放阅读框序列,将该基因片段插入到真核表达质粒pPIC9K中构建pPIC9K-SPLUNC1重组质粒,然后将pPIC9K-SPLUNC1重组质粒线性化并电击转化入毕赤酵母GS115中,经甲醇诱导蛋白表达后用SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定目的蛋白。结果表明,经RT-PCR扩增成功获得大小为748bp的SPLUNC1基因;构建的pPIC9K-SPLUNC

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