敲低E2F1基因对肾透明细胞癌细胞株Caki-2细胞增殖和侵袭力的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fan20090603
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目的 观察敲低E2F1基因后对肾透明细胞癌细胞株Caki-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 选取肾透明细胞癌细胞株Caki-2,应用脂质体lipo2000将E2F1小干扰RNA(siRNA)序列和阴性对照E2F1序列转染进细胞株,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测转染后E2F1的表达,并通过MTS和Transwell法检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化.结果 转染siRNA-E2F1组的E2F1 mRNA水平为(37.770±3.782)×10-5,比较未转染组(130.100±6.301) ×10-5和阴性对照组(134.600±7.163)×10-5明显降低(P<0.05),E2F1蛋白水平也明显降低.在Caki-2中敲低E2F1后24、48、72、96 h MTS吸光度(A)值明显下降(P<0.05),转染后48 h细胞迁移实验中,转染siRNA-E2F1组的穿膜细胞数为(38.330±4.041),比较未转染组(83.000±8.888)和阴性对照组(87.330±6.429),穿膜细胞数明显减少(P<0.01);在细胞侵袭能力实验中,转染siRNA-E2F1组的穿膜细胞数为(78.330±7.572),比较未转染组(143.300±10.066)和阴性对照组(147.000±14.000),穿膜细胞数明显减少(P<0.01).结论 在肾透明细胞癌细胞株Caki-2中敲低E2F1基因表达后,其细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降。

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