猪瘟病毒NS3蛋白在真核细胞中的表达与定位

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为研究与猪瘟病毒NS3蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,采用PCR方法获得嬲,基因,将其定向克隆至pCMV—Myc真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定分析,将鉴定为阳性重组表达质粒命名为pMyc—NS3。采用脂质体介导法将pMyc—NS3转染至PK-15细胞和293T细胞,Westernblot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达。结果表明,成功构建重组表达质粒pMyc—NS3,Westernblot表明,NS3蛋白在PK15细胞和293T细胞中均得到表达,NS3在PK一15和293T细胞质中呈弥散性分布。说明,成功
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