【摘 要】
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克隆猪细小病毒(PPV)VP2基因全长1740bp,构建其原核表达载体后进行蛋白的表达与纯化,接种家兔制备多克隆抗体。用PCR方法扩增PPVVP2全长基因,扩增产物克隆至表达载体pET-32a并转化
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31372401)
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克隆猪细小病毒(PPV)VP2基因全长1740bp,构建其原核表达载体后进行蛋白的表达与纯化,接种家兔制备多克隆抗体。用PCR方法扩增PPVVP2全长基因,扩增产物克隆至表达载体pET-32a并转化至E.coliBL21(DE3)感受态中。分别用不同诱导时间、IPTG浓度、温度诱导表达VP2重组蛋白,经SDS-PAGE电泳切胶回收纯化目的蛋白。对家兔进行3次免疫后,采集血清制备抗体。PCR扩增得到1740bp的VP2基因片段;构建原核表达载体pET-32a—VP2,经37℃,IPTG浓度1.0mmol/L
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