【摘 要】
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以滴水珠的幼嫩叶片为材料,对影响原生质体分离纯化、培养及植株再生的因素进行了研究。结果表明:适合滴水珠叶片的酶解体系为13%CPW(细胞原生质体洗液)+1.0%纤维素酶+0.1%果
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以滴水珠的幼嫩叶片为材料,对影响原生质体分离纯化、培养及植株再生的因素进行了研究。结果表明:适合滴水珠叶片的酶解体系为13%CPW(细胞原生质体洗液)+1.0%纤维素酶+0.1%果胶酶,p H 6.0,适宜酶解温度为25~28℃,酶解时间为4 h;滴水珠叶肉原生质体纯化以上浮法蔗糖梯度离心效果最佳,以25%的蔗糖做梯度材料,500 r·min-1离心10 min;用于培养滴水珠原生质体的培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+0.25 mg·L-1NAA 13%甘露醇,培养3 d有细胞分裂启动迹象,30 d左右形成愈伤组织,转移至MS+0.5 mg·L-16-BA+0.25 mg·L-1NAA固体培养基上增殖培养,并继代数次,5~6个月后愈伤组织可分化出芽并再生植株。
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