【摘 要】
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本研究采用两步PCR的方法,合成拟南芥蔗糖合酶At SUS1的编码基因,并将其亚克隆到携带糖基转移酶UGT76G1基因的表达质粒p ET28a-UGT上,构建了双酶共表达质粒p EUGT-SUS。将质
【基金项目】
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基金项目：国家自然科学基金项目（21106068）,江苏省自然科学基金项目（BK2011801）,高等学校博士学科点专项科研基金（20113221120002）,江苏省普通高校自然科学研究项目（10KJB530004）.
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本研究采用两步PCR的方法,合成拟南芥蔗糖合酶At SUS1的编码基因,并将其亚克隆到携带糖基转移酶UGT76G1基因的表达质粒p ET28a-UGT上,构建了双酶共表达质粒p EUGT-SUS。将质粒p EUGT-SUS转化到大肠杆菌Rossetta（DE3）中,在自诱导培养基中培养12 h,收集细胞超声破碎取其上清液为粗酶液用于催化甜菊甙合成莱鲍迪甙A的反应,结果确定重组酶At SUS1获得了活性表达,在双酶反应体系中,蔗糖和UDP在At SUS1作用下生成UDP-葡萄糖,供给UGT76G1所催化的糖
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