近交五指山小型猪SLA—DQA基因的克隆及在大肠杆菌的原核表达

来源 :甘肃农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maybeen
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采用RT—PCR方法扩增五指山猪SLA—DQA基因cDNA。克隆人测序载体,测序结果与GeneBank(登陆号:AY243104)的序列相同。大小为768bp,该基因编码255个氨基酸残基和一个终止密码,预计蛋白分子量为28kD.将这个基因克隆到原核表达载体PET—28a(+)中。经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确,插入到表达载体中,阅读框是正确的,从而构建成重组表达载体PET—28a(+)—DQA.重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达,对表达的蛋白用SDS—PAGE电泳分
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