【摘 要】
：
目的 观察结肠癌细胞中上皮钙黏素基因( CDH1)启动子甲基化对上皮钙黏素(E-cadherin)和β－连接素(β-catenin)表达的影响.方法 通过甲基化特异性PCR(MSP)、逆转录－聚合酶链反应
【机 构】
：
昆明医学院第一附属医院生物治疗中心,昆明医学院第一附属医院肝胆外科,昆明医学院第一附属医院肿瘤治疗中心
论文部分内容阅读
目的 观察结肠癌细胞中上皮钙黏素基因( CDH1)启动子甲基化对上皮钙黏素(E-cadherin)和β－连接素(β-catenin)表达的影响.方法 通过甲基化特异性PCR(MSP)、逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)检测DNA甲基化抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预前后人结肠癌HT-29细胞株CDH1基因启动子甲基化状态及E-cadherin mRNA的改变,并运用免疫荧光标记及激光共聚焦观察E -cadherin和β-catenin在细胞内的表达及分布.结果 (1)HT-29细胞在用药前CDH1基因启动子甲基化扩增阳性,非甲基化扩增阴性,用5-Aza-CdR处理后CDH1基因启动子甲基化扩增阴性,非甲基化扩增阳性；(2)5-Aza-CdR处理前细胞RT-PCR不能扩增出E-cadherin mRNA特异性条带,5-Aza-CdR处理后则可检测到E-cadherin mRNA转录,且mRNA水平与药物的浓度呈正相关,平均灰度比值1 μmol/L时为0.491±0.011,2μmol/L时为0.568±0.013(P＜0.05；(3)5-Aza-CdR 处理前细胞未见E-cadherin表达,β-catenin主要表达于细胞质及细胞核中,5-Aza-CdR处理后在细胞膜可见E-cadherin及β-catenin表达.且随着5-Aza-CdR诱导E-cadherin的表达,β-catenin在细胞膜的分布增加,而在细胞质及细胞核的分布明显减少.免疫荧光双重染色显示β-catenin胞膜分布与E-cadherin一致.结论 CDH1基因启动子甲基化可能是导致结肠癌细胞E-cadherin表达缺失及β-catenin异位分布的重要因素.
其他文献
目的 分析1970-2007年中山市鼻咽癌发病规律及趋势.方法 收集整理1970-2007年中山市肿瘤登记资料中鼻咽癌发病及病理资料,统计和分析其发病数、发病粗率、中国和世界标化发病
目的 评价参附注射液对肺叶切除术患者单肺通气期间气道阻力和氧合功能的影响.方法 择期胸段硬膜外阻滞复合全麻下行肺叶切除术患者60例,性别不限,年龄50 ～ 80岁,体重指数20
目的 探讨骨-骨膜原位翻转修复治疗髌骨软化症的软骨缺损方法,观察其中长期疗效.方法 1996年4月至2000年6月,拟在我院手术治疗的21例髌软骨软化症患者经术前和术中评估,接受
Tumor-induced osteomalacia (TIO),or oncogenic osteomalacia (OOM),is a rare acquired paraneoplastic disease characterized by renal phosphate wasting and hypophos
一、概述1995年,日本学者报道了一种以血清免疫球蛋白(Immunoglobulin,IG) G4水平升高和IgG4阳性淋巴-浆细胞的组织浸润为特征的纤维炎症性疾病,即自身免疫性胰腺炎(autoimmu
目的 探讨姜黄素对放射性血管内皮损伤的保护作用及其机制.方法 对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分离培养后分组,以2、4、6和8Gy4种不同剂量进行β线照射,并设未照射组为对照.分别
目的探讨小儿铜绿假单胞菌脓毒症的临床特点及其治疗措施。方法对广州市妇女儿童医疗中心儿童医院院区2008年5月-2010年7月收治的7例铜绿假单胞菌脓毒症病例资料进行回顾性分
分析了陶瓷纤维机制板的技术性能及在济钢热风炉上的应用效果。
The technical performance of the ceramic fiber plate and the application effect on the hot blast sto
目的 评价AcrysofToric复曲面人工晶状体在白内障手术中矫正角膜源性散光的临床效果及其旋转稳定性.方法 随机选取2009年6月至2010年5月行白内障手术的患者,接受白内障超声乳
目的 总结儿童不稳定骨盆骨折的治疗方法与教训.方法 1998年10月至2011年3月,治疗不稳定骨盆骨折患儿30例,男19例,女11例；年龄2～16岁,平均7.9岁；均为Torode-ZiegⅣ型,其中骶髂关