观察在人胶质瘤细胞中微小RNA(miRNA，miR)-148b-3p对长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)表达的调控作用。
方法通过生物信息学可见miR-148b-3p与HOTAIR基因相互配对。生物合成miR-148b-3p mimics、miR-148b-3p inhibitor和阴性对照(NC)，采用Lipofectamine 2000转染至胶质瘤细胞A172，通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析miR-148b-3p在人胶质瘤细胞A172中对HOTAIR表达的调控作用。构建HOTAIR基因野生型(WT)和变异型(MUT)荧光素酶载体，利用双荧光素酶报告基因系统检测miR-148b-3p对HOTAIR调控的靶向性。
结果RT-qPCR结果显示，NC组HOTAIR mRNA的表达量为1.06±0.15，miR-148b-3p mimics转染A172细胞24、48、72 h后，HOTAIR mRNA的表达量分别为0.79±0.12、0.63±0.18和0.39±0.06。miR-148b-3p inhibitor转染A172细胞24、48、72 h后，HOTAIR mRNA的表达量分别为1.24±0.09、2.70±0.24和3.56±0.18。与NC组比较，miR-148b-3p mimics下调HOTAIR基因的表达(t＝2.824、3.102、3.648，P<0.05)，miR-148b-3p inhibitor上调HOTAIR基因的表达(t＝2.742、3.761、3.928，P<0.05)。双荧光素酶报告基因系统显示，胶质瘤A172细胞中，共转染NC＋pmirGLO-WT-HOTAIR、NC＋pmirGLO-MUT-HOTAIR、miR-148b-3p mimics＋pmirGLO-WT-HOTAIR和miR-148b-3p mimics＋pmirGLO-MUT-HOTAIR的荧光素酶活性分别为1.18±0.03、1.23±0.09、0.64±0.02和1.12±0.01。共转染miR-148b-3p mimics＋pmirGLO-MUT-HOTAIR的A172细胞与共转染NC和重组载体的A172细胞之间荧光素酶活性差异无统计学意义(t＝0.459、0.427，P>0.05)。而共转染miR-148b-3p mimics＋pmirGLO-WT-HOTAIR的A172细胞与共转染miR-148b-3p mimics＋pmirGLO-MUT-HOTAIR的A172细胞比较，荧光素酶活性明显受到抑制(t＝3.362，P<0.05)。
结论在胶质瘤细胞中，miR-148b-3p对HOTAIR基因具有直接靶向调控作用，HOTAIR为miR-148b-3p的靶基因。