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以重组毕赤酵母Gs115/pPICZaA-Prochy为凝乳酶生产菌种,研究其在5L发酵罐水平的最佳产酶条件,为中试生产提供依据。采用批量发酵,甲醇浓度0.1%,诱导阶段每12h添加10g/I.蛋白胨,发酵液pH值为3.0,油酸浓度0.2%,诱导初期批量加入10g/L山梨醇共基培养,诱导84h可获得152SU/mL的酶活力。采用十二烷基磺酸钠.苯琼脂糖凝胶电泳分析,在发酵液(去菌体后)样品盐离子浓度2mol/L,流速2.5mL/min,酶回收率达到82%,浓缩倍数20倍。