【摘 要】
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目的:研究miR-877对血红蛋白诱导的离体星形胶质细胞损伤的作用及机制.方法:根据处理条件不同分为空白组(PBS处理)、血红蛋白组(血红蛋白处理)、miR-877 mimic组(血红蛋白处理,并转染miR-877 mimic)、miR-877 mimic NC组(血红蛋白处理,并转染miR-877 mimic NC).采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测SD大鼠星形胶质细胞miR-877表达水平;用Western blotting检测与细胞凋亡有关的蛋白(TLR4、NF-κB、Bax、B
【机 构】
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中国科学院大学深圳医院(光明)神经外科,深圳 518106
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目的:研究miR-877对血红蛋白诱导的离体星形胶质细胞损伤的作用及机制.方法:根据处理条件不同分为空白组(PBS处理)、血红蛋白组(血红蛋白处理)、miR-877 mimic组(血红蛋白处理,并转染miR-877 mimic)、miR-877 mimic NC组(血红蛋白处理,并转染miR-877 mimic NC).采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测SD大鼠星形胶质细胞miR-877表达水平;用Western blotting检测与细胞凋亡有关的蛋白(TLR4、NF-κB、Bax、Bcl-2)表达水平;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡;ELISA检测细胞炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)含量.结果:与空白组相比,血红蛋白组、miR-877 mimic NC组的细胞活力、Bcl-2蛋白表达水平下降,G2/M期期细胞比例、细胞凋亡率以及TLR4、NF-κB、Bax蛋白表达水平升高,IL-6、TNF-α、IL-1β含量增加(均P<0.05);与miR-877 mimic NC组相比,miR-877 mimic组的细胞活力、Bcl-2蛋白表达水平升高,G2/M期细胞比例、细胞凋亡率和TLR4、NF-κB、Bax蛋白表达水平降低,IL-6、TNF-α和IL-1β含量下降(均P<0.05).结论:miR-877可抑制由血红蛋白引起的星形胶质细胞炎症反应,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关.
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