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目的
研究双酚A(BPA)对离体培养青春前期大鼠睾丸支持细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和卵泡刺激素受体(FSHR)表达的影响。
方法取3只健康18~21日龄SPF级SD雄性大鼠进行睾丸支持细胞原代培养,48 h后分别暴露于含终浓度为0(溶剂对照)、30、50、70 μmol/L BPA的培养基中染毒24 h。采用MTT法检测支持细胞的细胞活性,分别采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)法和Western blotting法检测支持细胞N-cadherin、Vimentin及FSHR mRNA和蛋白的表达水平。
结果与溶剂对照组相比,50、70 μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且随着BPA染毒剂量的升高,睾丸支持细胞的存活率呈逐渐下降的趋势。与溶剂对照组相比,各剂量BPA染毒组睾丸支持细胞FSHR mRNA的表达水平均较高,而Vimentin mRNA的表达水平均较低,仅30 μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞N-cadherin mRNA的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与溶剂对照组比较,各剂量BPA染毒组睾丸支持细胞Vimentin蛋白及50、70 μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞FSHR蛋白的表达水平均较低,仅50 μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞N-cadherin蛋白的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论BPA通过干扰支持细胞内N-cadherin、Vimentin和FSHR蛋白的表达来影响正常的精子发生,从而产生睾丸毒性。