重组人HMGN2多克隆抗体的制备及应用

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目的制备人高迁移率非组蛋白N2(HMGN2)多克隆抗体,并用于HMGN2的亚细胞定位分析.方法提取人淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)总RNA,应用RT-PCR从其总RNA中分离HMGN2 cDNA,以pGEX-1λT为载体,构建HMGN2基因大肠杆菌表达载体.应用GST亲合层析柱分离GST-HMGN2融合蛋白,将此融合蛋白免疫新西兰兔,获得抗血清经正辛酸-硫酸铵分步沉淀法初步纯化.用ELISA法检测HMGN2抗体,免疫细胞化学染色法分析HMGN2的亚细胞分布.结果经酶切产物电泳分析和DNA序列测定证明成功
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