【摘 要】
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采用混合培养基模式将杂交瘤细胞进行减血清悬浮驯化培养,通过优化提高单克隆抗体的表达量,并进行抗体的分离纯化。在杂交瘤细胞悬浮培养优化过程中,最终确定的血清浓度为2%
【机 构】
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汕头大学医学院,中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室
【基金项目】
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国家863课题资助(2012AA02A406)
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采用混合培养基模式将杂交瘤细胞进行减血清悬浮驯化培养,通过优化提高单克隆抗体的表达量,并进行抗体的分离纯化。在杂交瘤细胞悬浮培养优化过程中,最终确定的血清浓度为2%胎牛血清,培养基配比为RPM1640∶SFM4CHO∶Opti CHO(4.5∶4.5∶1),接种密度为3×105cells/m L,采用批次补料流加培养,每2 d流加1次,每次流加量为初始体积的3%,抗体的表达量从原始的84 mg/L提高到168 mg/L。将其进一步在5 L搅拌式生物反应器中进行培养,离心后上清经protein A亲和层析纯化,确定抗体的产量为240 mg/L。
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