【摘 要】
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目的观察Toll样受体4(TLR4)在皮肤恶性黑色素瘤(CMM)中的表达及对叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)表达的影响,探讨其在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测TLR4和Foxp3在42例CMM、36例色素痣及30例正常皮肤的表达。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法检测脂多糖(LPS)活化黑色素瘤A3
【机 构】
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030001太原,山西医科大学公共卫生学院,030001太原,山西医科大学公共卫生学院;长冶医学院
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目的观察Toll样受体4(TLR4)在皮肤恶性黑色素瘤(CMM)中的表达及对叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)表达的影响,探讨其在肿瘤免疫逃逸中的作用。
方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测TLR4和Foxp3在42例CMM、36例色素痣及30例正常皮肤的表达。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法检测脂多糖(LPS)活化黑色素瘤A375细胞TLR4后Foxp3 m RNA和蛋白水平的表达。设计并构建TLR4小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体转染A375细胞,检测TLR4基因沉默对Foxp3 m RNA和蛋白表达的影响。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测CD4+ CD25- T淋巴细胞增殖能力。
结果在CMM、色素痣及正常皮肤组织,TLR4、Foxp3的阳性表达率分别为66. 7%(28/42)、41. 7%(15/36)、16. 7%(5/30)和95. 2%(40/42)、11. 1%(4/36)、0%(0/30),TLR4、Foxp3在CMM组织的阳性表达率显著高于色素痣及正常皮肤组织,差异有统计学意义(P< 0. 05),且两者表达呈显著正相关(r= 0. 883,P<0. 05)。LPS活化A375细胞TLR4可显著上调Foxp3 mRNA和蛋白水平的表达,TLR4基因沉默后再用LPS刺激A375细胞,Foxp3表达较对照组明显降低,且肿瘤细胞对CD4+ CD25- T淋巴细胞增殖的抑制作用明显减弱(P< 0. 05)。
结论TLR4信号通路激活可能通过上调Foxp3表达参与恶性黑色素瘤的免疫逃逸。
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