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目的探讨产胞外蛋白酶细菌的快速筛选方法和产酶条件优化。方法取昆明郊区的农田土壤及河沟淤泥,采用含脱脂奶粉的菌种筛选培养基和划线法分离产蛋白酶的菌株,选用5种培养基进行发酵产酶条件优化。结果农田土壤中含有种类较多的产蛋白酶的菌株,菌种单一性不强。YPD培养基发酵的菌种蛋白酶活性高于其他4种培养基。结论利用含脱脂奶粉的筛选培养基进行初筛,YPD进行发酵培养复筛,可以显著提高筛选效率。