HPLC-UV/ESI-MS法分析丹参不同提取组分

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目的对丹参4种不同组分进行HPLC-UV-MS分析,获得各组分的HPLC特征图谱并对各特征峰进行初步MS鉴定,同时定量测定指标成分丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量,以便更深入的探讨其在抗动脉粥样硬化作用的物质基础及谱效关系。方法采用Hedera ODS-2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),0.5%甲酸水溶液-乙腈(0 min,80∶20;50 min,15∶85)梯度洗脱,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:280 nm,建立以上各组分的HPCL指纹图谱,同时对各特征峰进行离子范围为150~750正负源ESI-MS总离子扫描,对相应特征峰的特征离子进行鉴定,用分子离子检测模式(SIR)分别对丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和隐丹参酮进行定量测定。结果所得HPLC特征图的特征峰峰形尖锐、对称,均达到基线分离;14个特征峰经质谱鉴定,对照有关文献可初步确定其成分;丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和隐丹参酮分别在0.05~10.0、0.05~20.0、0.05~20、0.05~20μg.mL-1与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 8),平均加样回收率分别为98.1%、99.0%、98.9%、99.5%。结论所得4种组分的HPLC特征图谱适合下一步的谱-效学及相关药理活性成分筛选研究;定量测定方法准确可靠,适合丹参药材中上述成分的含量测定;所建立的HPLC特征图谱能为丹参药材指纹图谱的建立提供依据。
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