【摘 要】
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目的 利用携带人MDA-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒(Ad.mda-7)作为载体,感染不同转移潜能的肝癌细胞MHCC97H,MHCC97L,Hep3B和正常的肝细胞L02,观察该基因对肝癌的选择性杀伤作用和增殖抑制作用.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞MHCC97H,MHCC97L和Hep3B,通过RT-PCR和ELISA方法观
【机 构】
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200080,上海市,上海交通大学附属上海市第一人民医院普通外科,200080,上海市,上海交通大学附属上海市第一人民医院普通外科,430030,武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科中心
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目的 利用携带人MDA-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒(Ad.mda-7)作为载体,感染不同转移潜能的肝癌细胞MHCC97H,MHCC97L,Hep3B和正常的肝细胞L02,观察该基因对肝癌的选择性杀伤作用和增殖抑制作用.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞MHCC97H,MHCC97L和Hep3B,通过RT-PCR和ELISA方法观察MDA-7基因的表达,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)观察该基因对肝癌细胞的生长抑制,Hoechst染色和流式细胞仪观察MDA-7对肝癌细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 RT-PCR提示复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株MHCC97H,MHCC97L,Hep3B和正常细胞L02中高效表达;ELISA方法检测提示细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的表达,而且随着感染时间延长表达量升高;MTT实验结果表明MDA-7能明显抑制肝癌细胞的生长,Hoechst染色和流式细胞仪提示MDA-7能促进肝癌细的凋亡;细胞周期检测提示肝癌细胞大量被阻滞在G2/M期,正常细胞没有增殖阻滞作用.各项结果提示MDA-7对正常的肝细胞没有促进凋亡和增殖阻滞的作用.结论 Ad.mda-7选择性的杀伤肝癌细胞,促进细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡与肝癌细胞的转移潜能无关。
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