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摘 要 本实验以川南地区的黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus Shiraki)的工蚁为对象,通过干燥和索氏脱脂法处理,再经氨基酸分析仪分析其氨基酸的种类和含量,发现其含水量为70.83%,脂肪占其干重的47.35%,16中氨基酸含量为其干重的40.79%;富含人体必需的氨基酸,其中苏氨基(Thr)含量为1.82%,缬氨酸(Val)含量2.74%,甲硫氨酸(Met)含量为2.15%,异亮氨酸(Ile)含量为2.24%,亮氨酸(Leu)含量为3.35%,苯丙氨酸(Phe)含量为2.44%,赖氨酸(Lys)含量为2.52%,组氨酸(His)含量为1.65%,为进一步开发川南白蚁资源提供一定的基础。
关键词 黑翅土白蚁 氨基酸分析 索氏脱脂法 必需氨基酸
中图分类号:S763.3 文献标识码:A DOI:10.16400/j.cnki.kjdks.2017.12.070
Amino Acid Analysis of Common White Ants in Southern Sichuan
LIU Jun
(The Research Institute for the Prevention and Control of Ant Termites, Zigong Sichuan 643000)
Abstract This experiment is to regional soil black wing termites (Odontotermes formosanus Shiraki) of the object, through the dry and saxhlet degreasing process, then through its types and content of amino acids, amino acid analyzer analysis found that the moisture content is 70.83%, fat accounted for 47.35% of its weight, 16 amino acid content of 40.79% of the dry weight; Is rich in essential amino acids, amino (Thr) content is 1.82%, among them Sue valine (Val) content is 2.74%, methionine (Met) content is 2.15%, isoleucine (Ile) content is 2.24%, leucine (Leu) content is 3.35%, phenylalanine (Phe) content is 2.44%, the content of lysine (Lys) was 2.52%, histidine (His) content is 1.65%, as the basis of further development of termite resources provide certain basis.
Keywords Odontotermes formosanus Shiraki; amino acid analysis; Soxhlet degreasing method; essential amino acid
昆蟲是地球上最大的生物类群,已有的研究表明许多种类昆虫蛋白质含量很高,[1]大于日常的鸡鸭鱼肉等食品,并且昆虫体内氨基酸比例与联合国粮农组织(FAO)制定的蛋白质中必需氨基酸的比例非常接近,[2]是一类极具开发潜力的蛋白质资源。[3]
白蚁种类繁多,分布广泛,白蚁虽然是一种害虫,但是白蚁体内含有大量的氨基酸、维生素、脂肪等,可作为饲料,医药保健品等,[4,5,6]故具有很高的经济价值。黑翅土白蚁(Odotoermes formosanus Shiraki)是一种土栖性白蚁,主要分布于在我国热带、亚热带地区等,[7]特别在川南地区种资源十分丰富。黑翅土白蚁已有国内学者做过研究,[8,9]但是白蚁种类及其分布具有地域特性,不能一概而论。本实验选用川南地区最常见的黑翅土白蚁的工蚁为对象,先去除脂肪,然后应用氨基酸测序仪分析其体内氨基酸的种类和含量,为开发川南地区白蚁资源提供一定参考价值。
1 材料与方法
1.1 材料
黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus Shiraki)的工蚂,由自贡白蚁防治科学研究所提供和鉴定。
1.2 仪器
日立全自动氨基酸分析仪 L-8900,四川理工学院提供。
1.3 方法
干燥:用酒精消毒从野外的白蚁样品,用电子天平准确称取白蚁样品,放入已干燥至恒重的烧杯中,将其置于60℃的常压干燥箱中,干燥过夜后取出。于干燥的环境中冷却至室温后称重,记好所称出来的质量,再放入干燥箱中继续干燥1h,取出称重。重复此操作,直到恒重为止。
脱脂:采用索氏提取法,将干燥后的白蚁用滤纸包住,放入索氏提取器中。在圆底烧瓶中加入2/3的乙醚,连接好装置,加热进行索氏提取。控制好加热的温度,使每次发生虹吸的时间为15分钟左右,虹吸次数20次。从而得到脱脂白蚁。最后取出脱脂的白蚁,称重。
氨基酸检测:用电子天平准确称取脱脂后白蚁样品,把称取的白蚁蛋白质加入到玻璃水解管中,再加入已配制好的6mol/L的HCL;然后把水解管连接到真空泵,调节真空泵,适当减压后,用酒精喷灯来封好玻璃水解管口放在110℃的干燥箱中水解24h;水解完后放在常压下冷却,冷却后再开管;水解液继续在80℃的水浴恒温锅中水浴,直到水解液蒸干为止,收集样品少量真空干燥、加缓冲液上样,0.02um微膜过滤,上日立全自动氨基酸分析仪 L-8900进行检测。 2 实验结果
2.1 白蚁中水分和脂肪含量
从野外的白蚁样品消毒后称取5g,不经过脱翅处理进行干燥,测得含水量平均值(n=5)为70.83%;得到白蚁干重样品后,进行脱脂反应,测得其脂肪含量占干重其平均值(n=5)为47.35%。可见黑翅土白蚁的工蚁中脂肪含量非常高。
2.2 白蚁中氨基酸检测
将2.1中脱脂后的白蚁干粉进过处理后,上样氨基酸分析仪检测,结果如下:
(1)氨基酸标准样品色谱图(见图1)。
(2)黑翅土白蚁中氨基酸色谱图(见图2)。
通过氨基酸测序仪进行分析,结果取平均值(n=5),由色谱图分析得到黑翅土白蚁工蚁(不经过脱翅处理)干重样品中16种氨基酸种类和含量如表1:
3 讨论
本实验显示,川南地区的黑翅土白蚁中工蚁水分含量为70.83%,与台湾乳白蚁水分含量接近,[10]其脂肪含量较高,占其干重的47.35%,故检测其氨基酸前经过脱脂处理,对于所得氨基酸的种类和结果更加准确。脱肪后经过酸水解再经氨基酸分析仪分析,检测到黑翅土白蚁中含有7种人体必须氨基酸,并且比例和含量比较高;另外检测其组氨酸(His)含量为干重的1.65%,这些都比国内其他文献报道的要高一些,分析认为是区域环境白蚁的种系进化发生变化,所以有所不同。另外从结果可以指导川南黑翅土白蚁中富含成人必需的多种氨酸,并且婴幼儿成长必需的组氨酸含量同样很高,这些人体必需氨基酸的含量都高于普通食品,是优质的蛋白质资源,另外白蚁中还含有多种维生素和微量元素,在抗氧化衰老,医药等方面有较大的应用价值,值得我们开发和利用。
四川理工学院横向项目(项目编号HX2015018)
参考文献
[1] Defoil art G R Ins ects as Human Food [J].Crop Pro.,1992(12):395-399.
[2] Parajul ee M N,Defoli art G R, Hogy D B. Mod el f or use in mass-production of Ach eta domest icus ( Orth o pt era: Gryllidae) as f ood [J].Ento.Soci.of Amer., 1993.86(5):1424-1428.
[3] 孙玮,周成贵.家白蚁作为营养、医疗、保健作用的初步探讨[J].氨基酸和生物资源,1993(3) :26-28.
[4] 周海滨.白蚁保健口服液的生产工艺[J].应用科技,1999(4) :9-9.
[5] 谢保国,谢华鸣,谢鸣荣. 白蚁资源的药用研究与开发[J]. 白蚁防治, 2005(3):45-46.
[6] 杨思齐.白蚁的开发与利用[M].江西科学技术出版社,2012.
[7] 谭速进.四川白蚁名录[J] .四川动物,2014.33(3):449-455.
[8] 戴自荣,等.常见白蚁氨基酸音量的比较[J].白蚁科技,1989.6(1).
[9] 張贞华,董兆梁.黑翅土白蚁及其菌圃的糖,脂肪,蛋白质,维生素,氨基酸分析[J].科技通报,1993(1):41-43.
[10] 姜丽红,邹湘武,宁涤,等.台湾乳白蚁蛋白质和脂肪含量初步分析[J].城市害虫防治,2013(4):20-23.
关键词 黑翅土白蚁 氨基酸分析 索氏脱脂法 必需氨基酸
中图分类号:S763.3 文献标识码:A DOI:10.16400/j.cnki.kjdks.2017.12.070
Amino Acid Analysis of Common White Ants in Southern Sichuan
LIU Jun
(The Research Institute for the Prevention and Control of Ant Termites, Zigong Sichuan 643000)
Abstract This experiment is to regional soil black wing termites (Odontotermes formosanus Shiraki) of the object, through the dry and saxhlet degreasing process, then through its types and content of amino acids, amino acid analyzer analysis found that the moisture content is 70.83%, fat accounted for 47.35% of its weight, 16 amino acid content of 40.79% of the dry weight; Is rich in essential amino acids, amino (Thr) content is 1.82%, among them Sue valine (Val) content is 2.74%, methionine (Met) content is 2.15%, isoleucine (Ile) content is 2.24%, leucine (Leu) content is 3.35%, phenylalanine (Phe) content is 2.44%, the content of lysine (Lys) was 2.52%, histidine (His) content is 1.65%, as the basis of further development of termite resources provide certain basis.
Keywords Odontotermes formosanus Shiraki; amino acid analysis; Soxhlet degreasing method; essential amino acid
昆蟲是地球上最大的生物类群,已有的研究表明许多种类昆虫蛋白质含量很高,[1]大于日常的鸡鸭鱼肉等食品,并且昆虫体内氨基酸比例与联合国粮农组织(FAO)制定的蛋白质中必需氨基酸的比例非常接近,[2]是一类极具开发潜力的蛋白质资源。[3]
白蚁种类繁多,分布广泛,白蚁虽然是一种害虫,但是白蚁体内含有大量的氨基酸、维生素、脂肪等,可作为饲料,医药保健品等,[4,5,6]故具有很高的经济价值。黑翅土白蚁(Odotoermes formosanus Shiraki)是一种土栖性白蚁,主要分布于在我国热带、亚热带地区等,[7]特别在川南地区种资源十分丰富。黑翅土白蚁已有国内学者做过研究,[8,9]但是白蚁种类及其分布具有地域特性,不能一概而论。本实验选用川南地区最常见的黑翅土白蚁的工蚁为对象,先去除脂肪,然后应用氨基酸测序仪分析其体内氨基酸的种类和含量,为开发川南地区白蚁资源提供一定参考价值。
1 材料与方法
1.1 材料
黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus Shiraki)的工蚂,由自贡白蚁防治科学研究所提供和鉴定。
1.2 仪器
日立全自动氨基酸分析仪 L-8900,四川理工学院提供。
1.3 方法
干燥:用酒精消毒从野外的白蚁样品,用电子天平准确称取白蚁样品,放入已干燥至恒重的烧杯中,将其置于60℃的常压干燥箱中,干燥过夜后取出。于干燥的环境中冷却至室温后称重,记好所称出来的质量,再放入干燥箱中继续干燥1h,取出称重。重复此操作,直到恒重为止。
脱脂:采用索氏提取法,将干燥后的白蚁用滤纸包住,放入索氏提取器中。在圆底烧瓶中加入2/3的乙醚,连接好装置,加热进行索氏提取。控制好加热的温度,使每次发生虹吸的时间为15分钟左右,虹吸次数20次。从而得到脱脂白蚁。最后取出脱脂的白蚁,称重。
氨基酸检测:用电子天平准确称取脱脂后白蚁样品,把称取的白蚁蛋白质加入到玻璃水解管中,再加入已配制好的6mol/L的HCL;然后把水解管连接到真空泵,调节真空泵,适当减压后,用酒精喷灯来封好玻璃水解管口放在110℃的干燥箱中水解24h;水解完后放在常压下冷却,冷却后再开管;水解液继续在80℃的水浴恒温锅中水浴,直到水解液蒸干为止,收集样品少量真空干燥、加缓冲液上样,0.02um微膜过滤,上日立全自动氨基酸分析仪 L-8900进行检测。 2 实验结果
2.1 白蚁中水分和脂肪含量
从野外的白蚁样品消毒后称取5g,不经过脱翅处理进行干燥,测得含水量平均值(n=5)为70.83%;得到白蚁干重样品后,进行脱脂反应,测得其脂肪含量占干重其平均值(n=5)为47.35%。可见黑翅土白蚁的工蚁中脂肪含量非常高。
2.2 白蚁中氨基酸检测
将2.1中脱脂后的白蚁干粉进过处理后,上样氨基酸分析仪检测,结果如下:
(1)氨基酸标准样品色谱图(见图1)。
(2)黑翅土白蚁中氨基酸色谱图(见图2)。
通过氨基酸测序仪进行分析,结果取平均值(n=5),由色谱图分析得到黑翅土白蚁工蚁(不经过脱翅处理)干重样品中16种氨基酸种类和含量如表1:
3 讨论
本实验显示,川南地区的黑翅土白蚁中工蚁水分含量为70.83%,与台湾乳白蚁水分含量接近,[10]其脂肪含量较高,占其干重的47.35%,故检测其氨基酸前经过脱脂处理,对于所得氨基酸的种类和结果更加准确。脱肪后经过酸水解再经氨基酸分析仪分析,检测到黑翅土白蚁中含有7种人体必须氨基酸,并且比例和含量比较高;另外检测其组氨酸(His)含量为干重的1.65%,这些都比国内其他文献报道的要高一些,分析认为是区域环境白蚁的种系进化发生变化,所以有所不同。另外从结果可以指导川南黑翅土白蚁中富含成人必需的多种氨酸,并且婴幼儿成长必需的组氨酸含量同样很高,这些人体必需氨基酸的含量都高于普通食品,是优质的蛋白质资源,另外白蚁中还含有多种维生素和微量元素,在抗氧化衰老,医药等方面有较大的应用价值,值得我们开发和利用。
四川理工学院横向项目(项目编号HX2015018)
参考文献
[1] Defoil art G R Ins ects as Human Food [J].Crop Pro.,1992(12):395-399.
[2] Parajul ee M N,Defoli art G R, Hogy D B. Mod el f or use in mass-production of Ach eta domest icus ( Orth o pt era: Gryllidae) as f ood [J].Ento.Soci.of Amer., 1993.86(5):1424-1428.
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[10] 姜丽红,邹湘武,宁涤,等.台湾乳白蚁蛋白质和脂肪含量初步分析[J].城市害虫防治,2013(4):20-23.