【摘 要】
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目的：建立一种新的荧光标记的钠离子-葡萄糖协同转运蛋白2（sodium-glucose cotransporter 2,SGLT2）葡萄糖转运的测定方法。方法：合成人全长SGLT2 cDNA,构建pIRES2-EGFP-SGLT2重组
【机 构】
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新药作用机制研究与药效评价北京市重点实验室中国医学科学院药物研究所药理室
【基金项目】
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国家“十二五”科学和技术发展规划（2012ZX09301002-004,2012ZX09103-101-063）资助
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目的：建立一种新的荧光标记的钠离子-葡萄糖协同转运蛋白2（sodium-glucose cotransporter 2,SGLT2）葡萄糖转运的测定方法。方法：合成人全长SGLT2 cDNA,构建pIRES2-EGFP-SGLT2重组质粒,酶切鉴定并测序验证其构建的正确性。瞬时转染HEK293细胞后,构建SGLT2高表达细胞株;采用激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞仪检测其转染效率及转录活性,Western Blot法检测目的蛋白SGLT2表达情况。以荧光标记的脱氧葡萄糖2-NBDG作为示踪剂,应用流式细胞术
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