逆转录病毒载体介导PIG—A基因在突变型K562细胞中的表达

来源 :中国血液流变学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wzx85695021

【摘要】

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目的应用逆转录病毒载体将PIG—AeDNA转导至突变型K562细胞中，观察是否能够逆转K562细胞CD59的表达。方法采用PCR方法从质粒pEBPIG—A中扩增PIG-A基因片断，BamHI及XhoI双酶切后

【作者】

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李振宇徐开林邱婷婷潘秀英何徐彭孙海英李德鹏鹿群

【机构】

：

徐州医学院附属医院血液科

【出处】

：

中国血液流变学杂志

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

：

逆转录病毒载体 PIG—A基因突变型K562细胞 retroviral vector PIG-A gene mutant K562 cell

【基金项目】

：

江苏省高校自然科学基金资助项目（03KJB20139）

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目的应用逆转录病毒载体将PIG—AeDNA转导至突变型K562细胞中，观察是否能够逆转K562细胞CD59的表达。方法采用PCR方法从质粒pEBPIG—A中扩增PIG-A基因片断，BamHI及XhoI双酶切后连接至逆转录病毒载体pLEGFP-C1相应位点。脂质体法转染PA317包装细胞，收集病毒上清感染突变型K562细胞，流式细胞仪测定感染前后CD59的表达情况。结果重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞后，24～48h荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达。C,418筛选后，病毒滴度测定达（1．6

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