【摘 要】
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建立一种鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无的DNA分子标记鉴别方法。通过测序获得延胡索、齿瓣延胡索、夏天无及其近缘种14种共56个样品的mat K,trn G和trn H-psb A序列,利用Bi
【机 构】
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安徽中医药大学药学院; 安徽医科大学药学院; 安徽省中医药科学院中药资源保护与开发研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81703633,81803675)
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建立一种鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无的DNA分子标记鉴别方法。通过测序获得延胡索、齿瓣延胡索、夏天无及其近缘种14种共56个样品的mat K,trn G和trn H-psb A序列,利用Bio Edit 7. 2. 2软件比对获得SNP位点,根据变异位点设计AS-PCR鉴别引物,并优化PCR条件,根据特异性条带分别对延胡索、齿瓣延胡索和夏天无进行鉴定。结果显示模板量(0. 6~1 200 ng)和退火温度(42~60℃)对扩增结果影响较小,循环次数对扩增结果影响较大。在循环数为20时,延胡索、齿瓣延胡索和夏天无分别扩出297 bp(mat K)、353 bp(trn G)和544 bp(mat K)的特异性条带。该研究所建立的方法对延胡索的最低检测限为6 ng,对夏天无的最低检测限为60 ng,齿瓣延胡索低于0. 6 ng。该文所建立的位点特异性PCR法能特异性鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无。
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