【摘 要】
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目的:探讨低度增高的棕榈酸联合脂多糖对胰岛β细胞活力的影响及可能机制.方法:采用0.15 mmol/L棕榈酸和50 ng/mL脂多糖单独、联合刺激大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞24h后,通过C
【机 构】
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南京医科大学第二附属医院内分泌科 江苏南京210011江苏省中西医结合医院内分泌实验室 江苏南京210028;淮安市第一人民医院内分泌科 江苏淮安223001;江苏省中西医结合医院内分泌科 江苏南京2
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目的:探讨低度增高的棕榈酸联合脂多糖对胰岛β细胞活力的影响及可能机制.方法:采用0.15 mmol/L棕榈酸和50 ng/mL脂多糖单独、联合刺激大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞24h后,通过CCK8法检测细胞活力,Western blot方法检测细胞内神经鞘脂代谢的关键酶-中性神经酰胺酶(NCDase)的蛋白表达水平.进一步建立过表达NCDase基因重组质粒pEGFP-C3-NCDase并转染INS-1细胞后,用棕榈酸、脂多糖联合刺激24h,再通过CCK8法检测细胞活力.结果:与对照组相比,0.15 mmol/L棕榈酸或50 ng/mL脂多糖分别刺激INS-1细胞24h后对其细胞活力的影响无统计学意义(P>0.05),但二者联合刺激可明显降低INS-1细胞的活力(P<0.05).与对照组相比,单独棕榈酸或脂多糖刺激INS-1细胞后并不影响细胞内NCDase的蛋白表达,但联合刺激可显著下调NCDase的表达(P<0.05);与pEGFP-C3+棕榈酸+脂多糖组相比,pEGFP-C3-NCDase明显削弱了棕榈酸联合脂多糖对INS-1细胞活力的抑制作用(P<0.05).结论:低度增高的棕榈酸与脂多糖协同刺激可产生β细胞毒性作用,其机制可能与下调胰岛β细胞内NCDase表达有关.
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