缘毛雀麦ISSR-PCR反应体系的建立和优化

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以缘毛雀麦基因组DNA为模板,对ISSR反应体系中的一些重要参数进行探索和优化试验,初步建立了一套雀麦属牧草ISSR分析的优化反应体系及反应程序。在20μl反应体系中,含有2.0mmol/L Mg^2+、2.0U Taq酶、0.3mmol/L dNTP、0.5μmol/L引物和30ng模板DNA。反应程序:第1个循环,基因组DNA经94℃预变性5min;45个循环为94℃变性45s,54℃退火60s,72℃延伸90s;最后1个循环完成后,在72℃下延伸7min。
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