【摘 要】
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目的:探讨羧甲司坦抑制香烟烟雾提取物(CSE)诱导A549细胞炎性损伤的作用。方法:传代培养人A549细胞并分为5组:对照组,CSE组,羧甲司坦低、中、高剂量组(予不同浓度羧甲司坦孵
【机 构】
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广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂; 呼吸疾病国家重点实验室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院; 广州医科大学病理教研室;
【基金项目】
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广东省重大科技专项(编号:2012A080201003);国家自然科学基金(编号:81470234)
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目的:探讨羧甲司坦抑制香烟烟雾提取物(CSE)诱导A549细胞炎性损伤的作用。方法:传代培养人A549细胞并分为5组:对照组,CSE组,羧甲司坦低、中、高剂量组(予不同浓度羧甲司坦孵育和CSE诱导)。qRT-PCR、ELISA检测主要细胞因子的合成和释放,免疫蛋白印迹(Western-blot)、免疫荧光(IF)观察NF-κB及MAPK相关信号通路的活化情况。结果:以羧甲司坦预处理或后处理,均可降低CSE诱导的A549细胞的IL-6、IL-8和MIP-1βmRNA的表达;降低IL-6及IL-8的释放。羧甲司坦预处理可抑制p65入核。Western-blot结果显示,对照组,CSE组,羧甲司坦低、中、高剂量组的P-p65蛋白相对表达量分别为(0.17±0.05)、(0.90±0.19)、(0.68±0.15)、(0.64±0.12)和(0.57±0.13),pERK1/2蛋白相对表达量分别为(0.30±0.10)、(1.25±0.33)、(1.01±0.19)、(0.89±0.22)和(0.81±0.18),CSE组均明显高于对照组,羧甲司坦低、中、高剂量组均明显低于CSE组(P<0.05)。结论:羧甲司坦通过抑制NF-κB p65及ERK1/2 MAPK活化,发挥对CSE诱导的A549细胞炎性损伤的保护作用。
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