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【摘要】目的了解2013年哈尔滨市儿童流感病原学流行特点，为本地区儿童流感病毒感染的防治提供基础数据和科学根据。方法采集2013年哈尔滨市儿童医院流感样病例的的鼻咽拭子标本，用荧光定量PCR法和MDCK细胞培养法检测流感病毒，微量血凝抑制（HI）实验进行型别鉴定，并对其病原学监测结果进行分析。结果2013年全年共检测儿童流感样病例鼻咽拭样品514份，分离到流感病毒28株，阳性率为5.4%，其中H3N2亚型20株（占71.4%），甲型H1N1 8株（占28.5%）；3岁及以下年龄组分离到的流感毒株占全年总毒株数的50%（14/28）；流感病毒分离高峰出现在2月份，阳性率高达17.5%。结论学龄前儿童更易感染流感病毒；哈尔滨市儿童流感流行优势株2013年年初以H3N2亚型流感病毒为主，至年末以甲型H1N1为主；儿童流感流行主要集中在冬春季节。
【关键词】流感病毒；病原学；儿童
【中图分类号】R-0【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2014）06-0344-01
小儿流行性感冒主要指发生于婴幼儿的流行性感冒（简称流感），是流行性感冒病毒引起的常见急性呼吸道传染病，传播力强，常呈地方性流行。在流感流行早期,35%～50%的感染者是学龄儿童[1], 每年流感的爆发流行中有15%～20%的儿童会感染流感[2]。婴幼儿感染流感病毒易并发肺部感染，因此儿童是流感监测的重点人群，防治工作不容忽视。
1.材料和方法
1.1材料根据全国流感/人禽流感监测实施方案[3]，从作为国家哨点医院的哈尔滨市儿童医院采集发病3天内的流感样病例 (体温≥38 ℃，伴咳嗽或咽疼痛之一者，缺乏其他实验室确定诊断依据)的咽拭子标本，在4℃保存条件下于24小时内送至实验室进行检测。
1.2方法按照全国流感监测技术指南中的方法进行。样品进行核酸的提取，采用荧光PCR方法进行初筛检测，核酸检测阳性的标本开展病毒分离工作，采用MDCK细胞培养分离方法，用1.5%豚鼠血血球进行微量血凝试验(HA)检测病毒的存在及滴度，血凝抑制试验(H I)进行流感病毒滴度和型别鉴定，所有阳性毒株均送国家流感中心进行复核鉴定。
2.结果
2.1 流感病毒毒株分离结果2013年共采集儿童流感样病例鼻咽试子标本514份，全部进行流感病毒荧光定量PCR检测，其中核酸阳性的28份样品，进行MDCK细胞培养，分离到流感病毒28株，阳性率为5.4%。经微量血凝抑制实验鉴定，其中H3N2亚型20株，占71.4%（20/28），甲型H1N1 8 株，占28.5%（8/28）。全部经国家流感中心复核确认。
2.2 流感毒株的月份分布 通过表1可以看出，流感病毒流行发生在2013年初和年末，即冬春季节，其中2月份分离阳性率最高，达17.5%；其次是1月份，达15.5%；3月份达11.9%；12月份打7.8%。同时，从表1可以看出，在2013年1-3月流感毒株优势株以H3N2亚型为主，而2013年12月份则以甲型H1N1为主。
表12013年哈尔滨市儿童流感监测期间各月份流感毒株分布统计表
月份 检测份数 阳性数 阳性率（%） 病毒型别
H3N2 甲型H1N1
2013.1 58 9 15.5 7 2
2013.2 40 7 17.5 6 1
2013.3 42 5 11.9 5 0
2013.4-11 285 0 0 0 0
2013.12 89 7 7.8 2 5
合计 514 28 5.4 20 8
2.1 流感毒株的年龄分布 2013年监测的儿童流感样病例年龄最小为9个月，最大为15岁。其中3岁及以下年龄组分离到的流感毒株14份，占全年总毒株数的50%（14/28），其次为4～7岁年龄组毒株为11份，占毒株总数的39.3%（11/28），8岁以上年龄组毒株为3份，占毒株总数的10.7%（3/28）。
表22013年哈尔滨市儿童流感监测期间各年龄组流感毒株分布统计表
年龄组（岁） 检测份数 阳性数 阳性率（%） 毒株年龄构成比（%）
0～ 288 14 4.8 50.0
4～ 158 11 6.9 39.3
8～ 68 3 6.8 10.7
合计 514 28 5.4
3.讨论
从2013年哈尔滨市儿童流感病毒病原学监测结果来看，流感流行季节主要集中在冬季和春季，因哈尔滨市地处我国北方，冬春季节气温低，人群呼吸道粘膜抵抗力下降，是流感的高发季节。而儿童发病多以低年龄组为主，尤其是学龄前儿童，因儿童尤其是婴幼儿，各器官组织发育不完善，抵抗力低下，病毒、细菌等病原体极易通过口、鼻途径直接进入呼吸道而引发感染。由于冬季温度变化较大，易造成儿童机体周围温度经常发生骤变，或者长时间的门窗紧闭，空气不能得到很好的流通，加上空气较干燥、大气污染、雾霾较重等原因，各种病原微生物易于乘虚而入，增加了儿童感染呼吸道疾病的机会。我们的监测结果表明在2013年1-3月流感毒株优势株以H3N2亚型为主，而2013年12月份则以甲型H1N1为主，这也提示我们年初的优势株不同于年末，是否预示着下一年度流感的流行株的会就此发生转变，流感病毒的变异不断向人类对它的防范提出挑战，现今已出现人感染禽流感病例，因此在冬春两季对流感病人进行监测并在监测的基础上及时发现有流行意义的流感病毒新变种，特别是能引起大的流行的病毒变异株非常必要。
【基金项目】黑龙江省卫生厅科研项目(编号：2011-491)
【关键词】流感病毒；病原学；儿童
【中图分类号】R-0【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2014）06-0344-01
小儿流行性感冒主要指发生于婴幼儿的流行性感冒（简称流感），是流行性感冒病毒引起的常见急性呼吸道传染病，传播力强，常呈地方性流行。在流感流行早期,35%～50%的感染者是学龄儿童[1], 每年流感的爆发流行中有15%～20%的儿童会感染流感[2]。婴幼儿感染流感病毒易并发肺部感染，因此儿童是流感监测的重点人群，防治工作不容忽视。
1.材料和方法
1.1材料根据全国流感/人禽流感监测实施方案[3]，从作为国家哨点医院的哈尔滨市儿童医院采集发病3天内的流感样病例 (体温≥38 ℃，伴咳嗽或咽疼痛之一者，缺乏其他实验室确定诊断依据)的咽拭子标本，在4℃保存条件下于24小时内送至实验室进行检测。
1.2方法按照全国流感监测技术指南中的方法进行。样品进行核酸的提取，采用荧光PCR方法进行初筛检测，核酸检测阳性的标本开展病毒分离工作，采用MDCK细胞培养分离方法，用1.5%豚鼠血血球进行微量血凝试验(HA)检测病毒的存在及滴度，血凝抑制试验(H I)进行流感病毒滴度和型别鉴定，所有阳性毒株均送国家流感中心进行复核鉴定。
2.结果
2.1 流感病毒毒株分离结果2013年共采集儿童流感样病例鼻咽试子标本514份，全部进行流感病毒荧光定量PCR检测，其中核酸阳性的28份样品，进行MDCK细胞培养，分离到流感病毒28株，阳性率为5.4%。经微量血凝抑制实验鉴定，其中H3N2亚型20株，占71.4%（20/28），甲型H1N1 8 株，占28.5%（8/28）。全部经国家流感中心复核确认。
2.2 流感毒株的月份分布 通过表1可以看出，流感病毒流行发生在2013年初和年末，即冬春季节，其中2月份分离阳性率最高，达17.5%；其次是1月份，达15.5%；3月份达11.9%；12月份打7.8%。同时，从表1可以看出，在2013年1-3月流感毒株优势株以H3N2亚型为主，而2013年12月份则以甲型H1N1为主。
表12013年哈尔滨市儿童流感监测期间各月份流感毒株分布统计表
月份 检测份数 阳性数 阳性率（%） 病毒型别
H3N2 甲型H1N1
2013.1 58 9 15.5 7 2
2013.2 40 7 17.5 6 1
2013.3 42 5 11.9 5 0
2013.4-11 285 0 0 0 0
2013.12 89 7 7.8 2 5
合计 514 28 5.4 20 8
2.1 流感毒株的年龄分布 2013年监测的儿童流感样病例年龄最小为9个月，最大为15岁。其中3岁及以下年龄组分离到的流感毒株14份，占全年总毒株数的50%（14/28），其次为4～7岁年龄组毒株为11份，占毒株总数的39.3%（11/28），8岁以上年龄组毒株为3份，占毒株总数的10.7%（3/28）。
表22013年哈尔滨市儿童流感监测期间各年龄组流感毒株分布统计表
年龄组（岁） 检测份数 阳性数 阳性率（%） 毒株年龄构成比（%）
0～ 288 14 4.8 50.0
4～ 158 11 6.9 39.3
8～ 68 3 6.8 10.7
合计 514 28 5.4
3.讨论
从2013年哈尔滨市儿童流感病毒病原学监测结果来看，流感流行季节主要集中在冬季和春季，因哈尔滨市地处我国北方，冬春季节气温低，人群呼吸道粘膜抵抗力下降，是流感的高发季节。而儿童发病多以低年龄组为主，尤其是学龄前儿童，因儿童尤其是婴幼儿，各器官组织发育不完善，抵抗力低下，病毒、细菌等病原体极易通过口、鼻途径直接进入呼吸道而引发感染。由于冬季温度变化较大，易造成儿童机体周围温度经常发生骤变，或者长时间的门窗紧闭，空气不能得到很好的流通，加上空气较干燥、大气污染、雾霾较重等原因，各种病原微生物易于乘虚而入，增加了儿童感染呼吸道疾病的机会。我们的监测结果表明在2013年1-3月流感毒株优势株以H3N2亚型为主，而2013年12月份则以甲型H1N1为主，这也提示我们年初的优势株不同于年末，是否预示着下一年度流感的流行株的会就此发生转变，流感病毒的变异不断向人类对它的防范提出挑战，现今已出现人感染禽流感病例，因此在冬春两季对流感病人进行监测并在监测的基础上及时发现有流行意义的流感病毒新变种，特别是能引起大的流行的病毒变异株非常必要。
【基金项目】黑龙江省卫生厅科研项目(编号：2011-491)