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用胸膜肺炎放线杆菌血清2型（1536）菌液与弗氏不完全佐剂等体积混合乳化后免疫大白兔，制备兔高免血清，提纯抗体，建立检测猪传染性胸膜肺炎血清2型抗体的双夹心ELISA方法。方阵滴定确定最佳反应条件：包被纯化的兔抗App血清2型抗体为9．375μg／mL，抗原稀释度为1：1600，HRP-兔抗猪IgG稀释度为1：20000。特异性与敏感性试验结果表明，双夹心ELISA方法特异性好、敏感性高，与猪O型口蹄疫、猪传染性胃肠炎、蓝耳病等阳性血清以及App其他血清型阳性血清无交叉反应。检测样品结果与阻断ELISA比